第 414 章 自我修复 (第2/2页)
记,自己感染事小,酿成爆发事故...你我就成罪人了。”
江承把这段完整记下,孙汉章把记录屏转向他,语气重新带上讲台上的节奏。
“.....当然,分离取材也有步骤规矩!
“....…无菌解剖操作,器械、容器、台面和样本转运路径都要经过灭菌与身份核对。”
“……根据组织结构选择钝性分离和锐性切开,能用钝性分离把组织层次推开的地方,尽量不破坏导能纹路;需要切断的部位,才用锐性切开,减少牵拉造成的二次损伤。”
“……取下来的组织低温保存,维持在经过验证的稳定温区,不能让样本反复升温又降温。”
江承看向那支密封管。
“您当时就是这样把灰白层取下来的?”
“那没有,我没敢连着纹路一起动。”孙汉章戴回外层手套,“它的原生物有一套类似血管功能的导能纹路,纹路贴着骨骼走,旁边衬着一层灰白物质,颜色和质地都跟周围组织不一样。”
“那层东西和脉络很近,却没有形成真正的连续管壁。我先用极细弯镊固定灰白边缘,采用钝性分离把表层和纹路分开,再用尖刀做锐性切开,逐层从骨质表面刮取。所有碎片都进密封管,取材前后分别称量、编号、拍照。”
“分离以后,怎么证明培养物来自那一层?”
“初代培养只是起点,不能把培养皿里长出东西直接等同于目标样本。”
孙汉章伸出一根手指,“我把取下来的组织分别做了低温保存、直接涂布和液体初代培养。初代培养出现生长迹象后,再做划线分离纯化,连续几轮划线,把不同形态的菌落分开。每一轮都挑取单菌落,单独转接,避免混合培养。”
他点开显微镜图像。
“形态鉴定先做革兰染色,观察细胞壁染色反应、菌体排列和聚集状态,再做扫描电镜,确认菌落表面、细胞外基质和边缘结构。”
“它的形态比较特殊,细胞并不呈常见杂菌那种团簇,也没有典型的芽生、分枝或孢子结构,贴壁后形成连续薄层。扫描电镜下,边缘整齐,细胞之间有规则的连接样结构。”
“这些能直接证明它是外星独有的微生物吗?”
“能支持判断,不能单独完成归属。”
孙汉章摇了摇头。“还要结合培养特性、代谢谱、核酸或类似遗传物质的检测、元素组成,以及对照样本的排除结果。外星生物未必使用地球上的DNA和RNA,检测方法得先确认它能不能识别目标。”
“医学研究最怕把仪器读数当成结论,读数只负责把问题摆到桌面上。”
江承抬起眼,像又回到当年刚入实验室时。
“那您怎么就想起来要刮那层灰白物质的?”
孙汉章把显示屏切到现场记录。
“解剖外星人躯体时,我是特意去了现场。当时外星人躯体的纹路是附着骨头走的,那一层却像蒙上去的,颜色、质地都不对。学医第一课,先学会看不对劲。看到了不对劲,才有后头的事。”
江承盯着图像,轻轻点头。
“我换作您,大概会把它当成脉络的一部分。”
“所以你还得继续跟着学,活到老学到老。”
孙汉章把培养记录调到第一组,闻言笑道。
“....我试了十四组条件。设计上采用正交组合和单因子梯度两套方法,正交设计用来筛选主要因素,单因子梯度用来确认每个因素的有效范围。”
“低氧、高湿、贴壁培养,葡萄糖、钙盐、镁盐和微量元素分别做增量、减量与缺失对照,碳氮比排四档,氧分压从接近饱和压一路降到最低生存门槛。”
他把十四组条件并排展开。
“每组做平行三管,另外设置不接种的空白对照,排除培养基本身发生浑浊、沉淀或化学变化。”
“还设置培养基批次对照、操作台面抹样、手套压样和环境沉降样。前六组,菌落形成单位,也就是CFU,平板计数显示活菌数不涨,部分组还持续下降。从第七组开始,活菌数出现连续增长,计数曲线才有了真正的上升段。”
“每三十分钟翻一茬,指的是什么?”
“那是显微计数和荧光活性读数的早期变化,不能直接等同于完整倍增时间。”
孙汉章点了点屏幕。
“正规的生长曲线要分延滞期、对数期和稳定期。我们先看到延滞期缩短,再进入对数期,菌体数量快速增加。根据对数期斜率计算比生长速率,再用ln2除以比生长速率得到倍增时间。”
“.....三十分钟是观察窗口里出现的近似翻倍趋势,最后还要以CFU平板计数复核。”
江承连忙把“倍增时间、比生长速率、CFU平板计数”圈了起来。
“确认它存活以后,我没急着高兴。”
孙汉章继续往下翻,“我又连续传了三代。每一代都做菌落计数,记录菌落直径、边缘形态、贴壁程度、细胞排列和代谢信号。”
“三代之间的生长曲线稳定,形态稳定,污染筛查合格,才能认定它在这个条件下扎住了根。杂菌往往会在多个条件里随机出现,形态也会随着培养基改变而漂移,它却对环境有明确偏好,落在合适区间以后能持续维持。”
“温度呢?”
“温度梯度四档,范围围绕初代培养观察到的适宜区间设置。”
“....pH做缓冲体系,略偏碱一点,不能只看培养基起始值,还要测培养过程中pH漂移。渗透压也要控制,过低会造成细胞破裂,过高会抑制代谢。碳氮比决定能量和合成底物的分配,接种密度则故意铺得稀,让每个菌落拥有清晰边界。”
孙汉章放大显微图。
“看这里,边缘整齐,细胞排列紧密,细胞质内看不到明显空泡,也找不到坏死堆。每个细节都要留档,这些细处,就是它存活下来的脚注。”
江承盯着十四组数据,轻声问:
“那要是十四组都没存活呢?”
“那就得换换方法。”孙汉章一点也不急,“医学这行最不缺绕路。今儿试不活,明儿换一组条件再来。条件试完了,还有别的路。试验目标没存活,换法子再来就是。真要怕,怕的是试都没试就收手。”
孙汉章露出一点笑意。
“不过,结论已经可以肯定....在特定环境下,这东西能够自我修复!”