第 415 章 肢体重生？ (第1/2页)
“.....我随后做了划痕实验，也就是SCratCh aSSay。先把目标菌铺成均匀的贴壁层，用无菌划痕工具在菌层中央制造线性缺口，同时设置未处理对照、培养基空白对照和热灭活样本对照。”
“划痕完成后，用延时摄影逐时间点记录，起始点、四小时、八小时、十二小时、二十四小时分别拍摄。图像分析不靠肉眼判断，计算闭合率、迁移面积和边缘推进距离。”
江承看着终端里的项目时间轴。
“....头一回是细线，我又划了一道宽的、一道圆的，深浅不一样，它都逐渐把缺口填平。缺口越窄、边缘细胞越密，收缩越快。”
“把每四小时那组照片按时间排列，能看到清楚的过程，先是边缘细胞改变形态，随后向缺口内迁移，最后由新生菌层完成闭合。多时间点、多个形状、多个深度，对照结果都一致，这才把它的修复能力钉在可见、可测、可重复的证据上。”
“您就把它当成修复因子了？”江承托着下巴，“老师，它为什么自己补得上？我从来没见过这种情况。”
“问到点子上了。”
孙汉章停了片刻，“但这个为什么，我还不敢拍胸脯说全懂。”
“....可能涉及细胞迁移、胞外基质重构、黏附蛋白表达，也可能存在特殊信号分子调控。我们已经检测到缺口边缘的代谢活动增强，细胞骨架发生重排，局部基质沉积也加快，可这些现象还不足以说明完整机制。”
他抬手点了点时间轴。
“到这一步我重复了多遍，每次刮取位置和深度都不同，结果仍然一致。可重复、可验证，才有资格往下走。”
江承把终端推到一边，语气里带着急切。
“那，您拿地球生物试了？”
“嗯，我用的试验品，就用了家畜。”
孙汉章把手撑在台沿上，他调出动物实验档案。
“本地养殖区一只母羊，后肢有长期开放性损伤，创口反复感染，肉芽组织生长差，饲养员已经在考虑淘汰。”
“我先做了基础清创和感染控制，确认全身状态稳定，再进入动物实验。SPF级动物条件下，先做小鼠和大鼠的体外相容性及局部给药筛查，随后才把羊只纳入组织修复观察。”
“...…不过，现在这种活菌不能直接进入活体。活菌进了活体，在哪儿落脚，会不会越过病灶向别处扩展，谁也不能打包票。”
“……所以我先做粗提液。菌体在受控条件下经过反复冻融，再配合超声裂解，让胞内成分释放出来。”
“……随后做差速离心，弃去大颗粒沉淀，保留上清。上清经过0.22微米无菌微滤，去除残余细胞和可培养活菌，再用不同截留分子量的超滤膜分级浓缩，记录每一组的截留分子量、浓缩倍数和回收率。”
“浓缩物还要做总蛋白定量？”
“当然！活性不能只用一支管子的体积描述，要按照总蛋白量、单位体积活性和单位蛋白活性分别标定。”
“每一批都先要做内毒素检测、无菌检验、支原体筛查和残余核酸检测。粗提液的活性标定仍然先做体外划痕实验，确认它能促进细胞层闭合，再进入动物剂量研究。”
孙汉章把三组动物曲线调出来。
“低、中、高三个剂量梯度，另设阴性对照。对照动物接受同样的清创、包扎和基础处理，只不给粗提液。”
“给药前要把动物品系、年龄、体质量、创面部位和损伤程度对齐。”
“每个嫦娥日同一时段做临床观察，体温、体质量、饮食、精神状态、创面面积、渗出液、结痂、肉芽组织、局部红肿和步态评分，都要记录。创面面积用标准化摄影结合图像分析，步态评分按承重、落地时间和跛行程度分级。”
“低剂量组反应轻，中剂量组愈合最顺，高剂量组局部炎症过强，体温升幅也过大。剂量存在治疗窗，不是越多越好。阴性对照组的创面按常规速度收缩，给药组的闭合率明显提高。”
“还要取组织做病理。不同时间点取皮肤、皮下组织、引流淋巴结和主要脏器，做组织病理学检查，观察炎症细胞浸润、肉芽组织形成、胶原沉积、血管新生和纤维化。”
“以及要做免疫原性检测，看看动物是否产生针对粗提液成分的抗体或细胞免疫反应。生物分布也得查，利用标记物追踪它在创面、血液、肝、肾、脾、肺里的分布和清除。只有局部有效、全身暴露可控、组织病理可接受，才有继续往下走的资格。”
江承把手指停在“SPF级动物、剂量梯度、阴性对照、组织病理、免疫原性、生物分布”一行。
“...送出去之前，我还做了活性标定。”孙汉章接着开口。
“把粗提液滴到刚铺好的细胞层上，看它能不能让缺口收拢。标定通过后，才配成待用剂量。”
“这一管我记了三样数，浓缩倍数、活性等级和剩余总蛋白量。以后就算这条线断了一辈子，别人照着这些数据，也能重新制备。药要能传下去，先得能复现。”
“...那活菌和这管东西到底差在哪儿？”
孙汉章敲了敲密封管。
“分寸。”
“……活菌进入活体，行为范围和定植位置都难预测。我取的是它在受控条件下释放出的成分，经过灭活、分离、过滤和浓缩，剂量可测，成分可追踪，风险可管控！”
他调出羊只实验记录。
“.....给药前，我把同批次羊只的损伤条件尽量对齐，同一侧、同一类断伤，病程接近，创口都完成清创和基础处理。低、中、高三组各自接受不同剂量，另留同类损伤的阴性对照。”
“不过，效果出乎意料！”
“第30分钟，给药组开始出现结痂；第48分钟，痂下出现新生肉芽，肉芽颜色和质地逐渐改善；第244分钟，给药母羊自行站起，用原来受损的后肢走到食槽前。对照
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